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时间:2024-06-29 00:00:00
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细胞计数板,又称血细胞计数板或改进尼霍夫计数板,是实验室中用于细胞计数的常用工具。正确运用细胞计数板,可以确保实验数据的精确性和牢靠性。上面,我们一同来看看细胞计数板的运用办法,协助在实验中完成精准计数。
1、资料预备
预备好细胞计数板、盖玻片、细胞悬液、显微镜、移液器、吸头、生理盐水或细胞培育基等。确保这些资料和工具都已清洗洁净并枯燥。
2、装置盖玻片
将盖玻片悄悄推放在细胞计数板的计数池上,确保盖玻片与计数池严密贴合,没有气泡或缝隙。
3、细胞悬液制备
从细胞培育物中取出过量悬浮细胞,运用移液器将细胞悬液滴在细胞计数板的数格中。留意防止气泡的发生,确保细胞悬液充沛填满数格。
4、悄悄摇摆
为了使细胞在数格内平均散布,可以略微悄悄摇摆细胞计数板。
5、静置
将细胞计数板平置于桌面上,静置2-3分钟,使细胞下沉并波动在数格内。
6、察看
运用显微镜,以10倍或20倍的物镜缩小倍数察看数格中的细胞。确保焦距调整妥当,以便明晰地看到细胞。
7、计数办法
以一个正方形的数格为单元,计数该数格中的细胞数量。遵照计数板上线计数规则,即计数板的四条边的数格细胞只计算该边上线格的细胞,而地方恣意一格线格的细胞都要计数。
8、计算浓度
将所计数的细胞数除以该数格的体积,失掉细胞的浓度。为了进步数据的精确性,建议计数至多3个数格,并将多个数格的计数后果求均匀,失掉最终的细胞浓度。
9、调整细胞悬液
依据实验需求,可以依据细胞计数失掉的浓度调整细胞悬液的体积,以到达所需的细胞数目。
10、清洗细胞计数板
实验完毕后,用生理盐水或细胞培育基重复冲洗数格,确保细胞悬液完全肃清。这有助于坚持细胞计数板的清洁和精确性。
1、无菌操作
在整个操作进程中,要严厉恪守无菌和平安操作标准,以避免净化和穿插感染。
2、防止气泡
在滴加细胞悬液和静置进程中,要尽量防止气泡的发生,以免影响细胞计数的精确性。
3、正确计数
在计数进程中,要遵照计数规则,确保计数的精确性。如有疑问或不确定的状况,可以重新计数或讨教专业人士。